美食文化但也适用于植物叶片中斑潜蝇卵的 检验

第九章 危险性害虫的检疫检验与处理 检疫检验的目的:发现、检出和鉴定植物病原物、 害虫、杂草和其他有害生物,为出证或检疫处理提供 依据。 检疫处理:通过中断或避免有害生......

  第九章 危险性害虫的检疫检验与处理 检疫检验的目的:发现、检出和鉴定植物病原物、 害虫、杂草和其他有害生物,为出证或检疫处理提供 依据。 检疫处理:通过中断或避免有害生物人为传播而 达到保证贸易和引种正常进行的目的。 第一节 昆虫与螨类的检疫检验 检疫检验包括现场检验与实验室检验。有害生物 种类不同,适用的检验方法也不同。适用的检验技术 应当符合下列基本要求: 1.准确可靠,灵敏度高; 2.快速、简单、方便易行; 3.有标准化的操作规程, 检验结果重复性好; 4.安全,不扩散有害生物。 一、害虫与螨类的检验方法 (一) 直接观察 (二)过筛检验 (三)解剖检验 (四)加热分离检验 (五)比重检验 (六)染色检验 (七)软X光透视检验 (八)诱捕检验 (九)检疫犬检查 (十)其它方法 (一) 直接观察 通过肉眼或手持扩大镜,对植物及其产品、包装 材料、运载工具进行检查。 适用范围:适于检验个体较大,特征较明显的害虫, 或危害状明显的植物及其产品。 欧洲榆小蠹危害状 瘿蚊-虫瘿 (二)过筛检验 利用多层筛将害虫与其载体筛选分离。 1.适用范围 主要用于检验粮谷、种子、油料、小粒 干果和生药材中混进的害虫。 2.用具与步骤 ?一般用多层筛。 ?将样品倒入筛中,回旋法筛之,而后分别将各层筛 上物及筛下物倒入白瓷盘中摊成薄层,肉眼观察检 查较大的害虫,筛下物收集在培养皿中,解剖镜下 检查较小的虫体。 (三)解剖检验 借助刀具剖开待检物品,检查是否有害虫存在。 1.适用范围 有明显被害状、食痕或有可疑症状的种 子、果实及其它植物产品,如食心虫、实蝇类危害的 果实;天牛、吉丁虫为害的枝干等。 2.用具与步骤 ?采用解剖刀、水果刀或剪刀。 ?在检验中若发现有害虫的产卵孔、蛀孔、虫粪、分泌 物等危害迹象时,需利用本方法进一步找到虫体。 (四)加热分离检验 原理:利用害虫在受热时苏醒或变得活泼的特点。 螨类检验中,利用活螨避光,怕热的习性,加热 分离之。 1.适用范围 多在冷凉季节或气温较低时 2.用具与步骤 将样品(粮谷、豆粒等)放入磁盘 或培养皿中,放在灯光或其它热源上面加热,一 些蛾类、小型昆虫或迟钝不动的昆虫受热后即爬 动而被分离出来。 3.应用举例 螨类的分离 1.烤螨法 将供试品放在特制的分离器或附有孔径 大小适宜的筛网的普通玻璃漏斗里,在漏斗的广口 上约6cm处用一个60~100W的灯泡照射1~2h。活螨 可沿漏斗内的底部细颈内壁下爬,漏斗下口处用小 烧杯装半杯甘油水收集。 2.热水漂浮法 将原糖样品置于锥形瓶中,温水 (30~35℃)溶解,溶液量以刚好不溢出为宜, 15~30min后,用载玻片沾取水面漂浮物,镜检观察 是否有螨类爬出。 (五)比重检验 根据有害籽粒和正常籽粒比重 不同,用盐溶液漂检分离的方 法。 1.适用范围 通常用于检查粮谷、谷类中的 害虫 。 2. 试剂与操作步骤 ①将试剂(如氯化钠、硝酸铁、硝酸铵等)根据需要 配成不同浓度的溶液; ②将过筛后的样品倒入溶液并充分搅拌1min,后静止 1min,则健粒下沉、被害粒上浮; ③捞出上浮样品,进一步检验。 ?试剂和溶液浓度的选择主要考虑样品的比重。如检 查谷象、米象为害的粮谷籽粒时,选用2%的硝酸铁 溶液;检查豆粒等的种子,可用饱和食盐水;检查松 籽中是否携带落叶松种子小蜂,用清水即可。 (六)染色检验 指利用某些植物或器官被害虫为害后,经特殊的 化学品处理后,可染上特有的颜色,以帮助检出害 虫或判断害虫成活与否的方法。 根据染色剂的不同,可分为高锰酸钾染色法、品 红染色法、碘或碘化钾染色法和油脂浸润法。各种 方法各有其一定的应用范围。 1. 高锰酸钾染色法 (1)试剂 1%高锰酸钾溶液、硫酸和过氧化氢混合液 (1%硫酸100ml加3%过氧化氢液1ml)与清水。 (2)步骤 ?将15g粮粒样品放入30℃温水中浸1min; ?然后转移到1%高锰酸钾液内染色1min; ?清水漂洗; ?滤纸吸干多余液体并镜检。将出现直径 0.5mm黑斑点 的子粒挑出剖检。 ?染色后转入硫酸和过氧化氢混合液内处理 30s,则米 象的产卵处染色成褐色斑点。 (3)适用范围 检验粮粒中的谷象、米象等。 2. 品红染色法 (1)主要试剂 酸性品红溶液(蒸馏水95ml,冰醋酸5ml,酸性品红 0.05g,充分混合) (2)步骤 取样品15g,30℃温水预浸1min后移入品红液中染色 25min,之后取出并用清水洗净,倒在白色吸水纸上, 镜检,凡有0.5mm左右樱桃红小点,即为被害粒。 (3)适用范围 同高锰酸钾法,但也适用于植物叶片中斑潜蝇卵的 检验。 3.碘染色法 (1)试剂 1%碘化钾液或2%碘酒溶液、0.5%氢氧化钾(钠)溶 液。 (2)步骤 ① 取代表样品50g,放入纱网或包于纱布袋中,浸入配 好的碘液中染色l~1.5min; 氢氧化钾溶液固定30s; 清水漂洗15~20s,之后镜检。凡豆粒表面有l~2mm 直径的黑色圆斑者,即为虫蛀粒,再进行剖检。 适于被豆象类蛀害的豆粒检验。 ② ③ (3)适用范围 ? (七)软X光透视检验 软X光透视和摄影检验种子,首先由瑞典皇家林学 院Simak、Kamra等人创造并提出。 原理:利用软x光波长较长(大于0.01nm),能级较低, 穿透力较弱,被检验的物体吸收率高,成像对比度强、 层次清晰的特点,对种子进行透视、摄影,以判断种子、 苗木及其他植物组织内钻蛀性害虫的发生情况。 1.仪器与操作方法 一般用Hy-35型农用软X光机。 操作方法:取样品100粒,单层平铺在仪器内样品台 上,开通电源,调节光强度和清晰度,通过观察窗, 即可在荧屏上观察。凡健康种子,全粒均匀透明;凡 有阴影斑点(块),即为虫蛀粒、空壳或内部有虫体。 ?荧光屏直接观察对桧、杉、粟等小粒种子不适用, 必须通过摄影、冲洗出底片才能正确检测。 2.应用举例 松籽中落叶松种子小蜂的检验 ① 软X光摄影检验 事先把2号或3号放大纸在暗室 用黑纸包好,把种子检验样品放在放大纸具有药膜 的那一面,置于X光机载物台上拍摄。 ② 软X光照片判别 种皮内颜色均为暗色者为空粒种 子,种皮、种仁连为一体均为白色者是健康饱满的 种子。种皮内有一个呈“C”型弯曲的幼虫影像, 其余部分为暗色者为落叶松种子小蜂寄生的种子。 种皮内有多个白色的影像重叠在一起,其余部分为 暗色者为小蜂的寄生昆虫。 (八)诱器检验 利用特异性诱剂,置于特制的诱捕器中诱测害虫 (主要是成虫)的方法。 ?主要用于产地、港口、车站、机场、货栈、仓库等 处的现场检验与疫情监测。 ? 诱器由诱剂、诱芯和诱捕器三部分组成。 苹 果 实 蝇 红 色 诱 捕 器 (九)检疫犬检查 ?检疫犬主要用于旅客携带物的现场 检查。 ?在检疫人员的带领下,检疫犬对旅 客包裹进行检查,若发现可疑物品 (如水果、食品或毒品等),检疫 犬会立即以训练出的固定姿态告知 检疫人员,检疫人员可据此要求旅 客开包检查。 ? 美国、加拿大、澳大利亚、新西兰、日本等发达国家, 自20世纪80年代以来,均已组建了检疫犬队,配合X光机 及检疫人员,对出入境行李进行检疫,使行李检疫更快 速,并使其检出率及准确率达到90%以上。我国自2002年 开始在北京、上海、广州等地陆续投入使用。 ? 应用检疫犬,不仅可以作为旅客申报单、X光机等检疫措 施的补充,提高检出率,还可以扩大检疫的影响力和威 慑力,有效地防止逃漏检。 ? 2002年9~11月投入使用以后,白云机场和天河火车站旅 检现场的违禁物查获批次较比年同期增长22.8%和26.7%。 (十)其他检验方法 1.饲养检验 将样品定量后置温箱内,定温在25~26℃ 下饲养3~5d或更长时间,测定害虫含量并鉴定种类。 2.塑料袋密封检验 将具有一定成熟度或有产卵痕的果 实用塑料袋密封数小时后,其中的果实蝇幼虫因缺氧 破果而出,可作形态鉴定或进一步饲养。 3.水盆观察法 将水果或蔬菜放入一个瓷盘内,支放在 盛有清水的大瓷盆上,再用40目尼龙纱罩上。室温下 观察7-10d,实蝇幼虫会从果中弹进大盆内。本方法主 要用于新鲜成熟度不高的水果。 二、检疫检验技术的发展趋势 随着国际贸易的迅猛发展,对检疫验放速度的要求越 来越高,努力提高检验效率成为目前各国检疫工作者亟 待解决的问题。检验技术的发展表现出两大明显特色: (一)对策上,加强产地检疫与预检,以提高检验结果 的准确性、可靠性,简化现场检验手续,提高验放速度。 (二)技术层面,手段多样化、技术现代化。 ?引进检疫犬,提高了旅检效率;针对斑潜蝇的传带特 点,发展出叶片染色法等。 ?在种类鉴定方面,生化技术、分子生物学技术的引入 大大加快了鉴定速度。如,采用凝胶电泳法可快速、 准确地鉴别4种多食性斑潜蝇;广州检疫局在国际上 首次将SYBR Green实时荧光PCR方法用于实蝇种类鉴 定和近似种区分,使得鉴定周期从20d以上缩短到2d 以内。 小 结 ? 害虫的检疫检验包括室内检验与现场检验。 ? 无论是直接检验、过筛检验、染色检验,还是解剖 检验、X光检验、诱器检验,都是发现和检出的手段。 各种方法在适用范围、精确度等方面均有不同。 ? 实践中,往往需要从实际出发,选用一种或将几种 方法相结合,达到检验目的。 ? 检出害虫后,还需要进一步的鉴定,才能得出最终 结论。 第二节 检疫处理 检疫处理一般由检疫机关通知货主或其代理人实 施,检疫机关对处理过程实施监督,以确保处理的有 效性。 检疫处理往往作为进境的限制条件,有时成为进 出境贸易的一种技术壁垒。 一、 化学处理法 化学处理法指利用化学药剂对有害生物进行除害 处理的方法。 化学处理的方法有熏蒸、喷雾、涂抹、浸泡等等。 植物检疫中,最常用的是熏蒸处理,其次是喷雾法与 浸泡法。 (一)熏蒸处理 指利用熏蒸剂产生的有毒气体在密闭设施或 容器中杀死有害生物。 1.适用范围 ? ? 适于运输工具、贮藏所、加工厂等的消毒。 适于处理粮食种子、植物无性繁殖材料、水 果、蔬菜、其它动植物产品、生长期植株、 工业品、土壤等。 2.熏蒸方式 ?常压熏蒸 ?线.熏蒸剂 参观真空熏蒸循环设备 常用熏蒸剂有溴甲烷、 磷化铝、硫酰氟等。 4.优点与局限性 优点:快速、高效,费 用低,残毒问题相对较 轻。 局限性:须在可密闭场 所或容器内进行。 (二)喷雾 主要用于运输工具、贮运场所的消毒。 (三)浸泡 主要用于种子、苗木或其它繁殖材料(接穗、球根、 块茎等)。 依法对国际航班消毒 二、物理处理法 (一)高温处理 高温处理即热处理,包括干热处理、热水处理、 蒸汽热处理、微波加热处理与高频加热处理。 其原理为:利用植物材料与有害生物耐热性的差 异,美食文化选择适宜的高温和处理时间以杀死有害生物而 不损害植物材料。 1.干热处理 ? 主要用于处理蔬菜种子,对多种种传病毒、细菌和 真菌有除害效果,但处理不当可能降低种子萌发率。 也用于处理原粮、饲料、面粉、包装袋、干花、草 制品、泥炭藓和土壤等。 ? 巴西豆象:55 ? 松墨天牛:60 ℃处理1h,或60 ℃处理0.5h。 ℃处理12h。 ? 局限性:不能用于生活的植物材料。 2.蒸汽热处理 采用蒸汽热处理炉。 ?用以处理水果和蔬菜,也用于种子、苗木消毒。 ?水果热蒸汽处理设施包括三部分: ①处理前的分级、清洁、整理车间; ②蒸汽热处理室; ③处理后的降温、去湿、包装车间。 ?蒸汽热处理的主要设备:热饱和蒸汽发生装置、蒸汽 分配管、气体循环风扇、温度监测系统。 3. 热水处理 ?用于处理植物种子和无性繁殖材料,杀死病原真菌、 细菌、线虫和某些昆虫。 ?热水浸泡处理巴西豆象:50℃,处理1h或52℃处理 0.5h。 4.微波加热处理 适于携带物检疫与邮寄物 检疫中处理量较小的非种用 材料。 优点:升温快,介质内部温 度往往高于外部,处理快速、 安全,效果可靠,费用低。 缺点:常出现被处理物品各 部分温度不均匀。 5.高频加热 ? 广泛用于处理粮食、种子、干果、竹木制品、 中草药、贵重食品等多种农副产品。受热均 匀。不宜用于含水量高于害虫含水量的物品, 如鲜果、蔬菜等。 (二)低温处理 1.速冻 在-17℃或更低的温度下急速冰冻被处理的农产品。 常用于加工用水果和蔬菜,杀灭害虫。 处理过程:处理时先迅速降温到-17℃以下,并保 持一定时间,处理期间温度不得高于-6℃。 2. 冷处理 指应用持续的不低于冰点的低温控制害虫。多用于处 理携带实蝇的热带水果。处理的时间常取决于冷藏的温 度与害虫的种类。如:实蝇类在0 ℃或0 ℃以下处理 10~13d即可死亡;梅象在0 ℃下需处理14d。 冷处理通常是在冷藏库内(包括陆地冷藏库和船舱冷 藏库)进行。处理的要求包括严格控制处理的温度和时 间。 低温处理前或处理后配合使用溴甲烷熏蒸可缩短处理 时间,并保证除害效果。 其它处理方法 ?核辐射 ?气调处理 小 结 ?检疫处理的方法与措施有多种,除害处理最为常见。 除害处理方法主要分化学处理与物理处理法。 ?化学处理以熏蒸法最常用。目前主要的熏蒸剂包括溴 甲烷和磷化铝。熏蒸方法有常压熏蒸与真空熏蒸。 ?物理处理一般对环境安全、无污染,主要利用温度进 行除害。分为高温处理与低温处理。 每种方法都有其优点与局限性,因此,适用的范围 有所不同,检疫处理中需要科学选用。

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